实现HBsAg清除是慢性乙型肝炎患者的关键治疗目标，但如何早期识别可实现这一目标的患者仍具有挑战性。近期，四川大学华西医院（884301）感染性疾病中心在《Liver International（IGIC）》中发表一项研究，在该研究中，联合HBsAg、HBV RNA和HBcrAg比单独使用HBsAg能更准确地预测HBsAg血清清除。三项标志物均处于低水平的患者实现HBsAg血清清除的可能性最大，凸显了这些生物标志物在个体化治疗策略中的潜在价值。
研究背景
乙肝病毒感染仍是全球公共卫生问题，全球约有2.54亿慢性感染者，每年导致约110万人死亡，主要死因为肝硬化及肝细胞癌；目前以核苷（酸）类似物（NA）为主的抗病毒治疗存在长期用药可能引发耐药和经济负担等局限。因此，寻找能够有效评估疗效、指导治疗调整的生物标志物至关重要。近年来，血清HBV RNA作为反映cccDNA转录活性的指标受到关注，因其在HBV DNA转阴后仍可能持续存在，显示出在监测疗效、指导停药及预测复发方面的潜力。在此背景下，北京大学人民医院（884301）联合北京大学基础医学院发表在BMC Gastroenterology上的最新研究旨在探索NA治疗期间HBV RNA的动态变化及其与HBV DNA、HBsAg的相关性，并评估其对病毒学应答和HBeAg血清学转换的预测价值，以推动HBV RNA成为临床实用的生物标志物。
研究方法
2020年至2024年间，来自中国九家医院（884301）的427名初治HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者被纳入研究。在24个月的核苷（酸）类似物治疗期间，分析了纵向HBV RNA-DNA-HBsAg相关性。评估了其对12个月时病毒学应答和24个月时HBeAg血清学转换的预测性能。
研究结果
HBV DNA、HBV RNA、以及HBsAg在治疗过程中水平均呈现下降趋势，HBV DNA下降最快，HBV RNA次之，HBsAg下降最缓慢。HBV RNA 的中位水平在基线、12 个月和 24 个月分别为6.63（4.60-7.61）、4.19（2.32-5.31） 和 2.10（2.00-3.02）log10 拷贝/mL；未产生病毒学应答患者具有更高的基线HBV DNA（中位数7.42 vs. 5.38 log10 IU/mL，）和HBV RNA（6.63 vs. 4.60 log10 copies/mL，）。
图1： 慢性乙型肝炎患者接受核苷（酸）类似物治疗后血清HBV标志物的变化。
(A) HBV DNA水平散点图。
(B) HBV RNA水平散点图。
(C) HBV DNA：HBV RNA比值散点图。
(D) HBsAg水平散点图
在HBV RNA与其他HBV血清学标志物的相关性分析中，结果显示在NA治疗前，HBV RNA与HBV DNA相关（r = 0.6380，P = 0.001），但与HBsAg无显著相关性（r = 0.1048，P = 0.0905）。在接受12个月NA治疗后，HBV RNA与HBV DNA（r = 0.5696，P = 0.0106）及HBsAg（r = 0.5196，P = 0.0010）均相关。在接受24个月NA治疗后，HBV RNA与HBV DNA的相关性消失（r = 0.6441，P = 0.0612），而与HBsAg仍保持强相关（r = 0.9167，P = 0.0005）。
对于病毒学应答（VR），12 个月的 VR 累积发生率为 49.4%（211/427）。6 个月的 HBV RNA（HR = 0.77，95% CI = 0.52–0.90，P = 0.03）、基线的HBV DNA/HBV RNA（HR = 2.51，95% CI = 1.46–4.32，P < 0.001）以及 6 个月的 HBV DNA/HBV RNA（HR = 2.43，95% CI = 1.61–3.67，P < 0.001）与12 个月的 VR 相关。其中，HBV DNA/HBV RNA比值与12个月的VR最相关。
至于预测12个月的VR率以及24个月的HBeAg血清学转换率，HBV DNA的风险比为0.16（），受试者工作特征曲线下面积为0.889，而HBV RNA的风险比为0.77（），曲线下面积为0.754（表格4）。有关HBeAg血清学转换，HBV DNA的风险比为0.01（），曲线下面积为0.900，而HBV RNA的风险比为0.72（），曲线下面积为0.703，突显了它们在这个关键时间点一致的预后价值。
表格4：预测12个月发生病毒学反应（VR）及24个月发生HBeAg血清学转换的AUROC曲线
研究结论
在核苷（酸）类似物治疗期间，HBV RNA的动态变化经历了从与DNA相关到与HBsAg相关的转变。HBV DNA/RNA在6个月时的早期下降可以预测病毒学应答和HBeAg血清学转换，从而确立此时间点作为一个可靠且临床实用的早期预测点。HBV RNA补充了现有生物标志物，可用于优化慢性乙型肝炎的管理。
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撰写：Brigette
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关于仁度
上海仁度生物（688193）科技股份有限公司（股票代码：688193）成立于2007年，是国内最早一批专注于RNA分子诊断技术和产品的生命科学企业之一，致力于开发临床需求尚未满足的创新诊断技术和产品。公司拥有RNA实时荧光恒温扩增（SAT）的独家专利技术平台，以该技术平台为基础自主研发了一系列分子诊断试剂和设备一体化产品，专注于为生殖、呼吸、消化、血液、食品、环境安全等领域病原体的精准诊断、有效防控和个性化诊疗提供解决方案。
仁爱生命 度衡健康
专注病原体RNA临床检测
研究背景
在目前CHB患者的治疗方案中，Peg-IFN-α与单用核苷（酸）类似物治疗相比，可获得更高的HBsAg血清清除率。然而，不同个体对Peg-IFN-α治疗的反应可能存在显著差异。多项研究一致表明，较低的血清基线HBV DNA和HBsAg水平（＜1500 IU/mL）以及乙型肝炎e抗原阴性是Peg-IFN-α治疗应答的独立预测因素。但在这种患者分层策略下，HBsAg血清清除的总体率仍不尽如人意。这可能反映了这些常用病毒学标志物与肝内cccDNA之间的弱相关性，限制了它们早期准确识别应答者的能力。因此，迫切需要发现新的cccDNA相关生物标志物，以便在治疗前识别最有可能从Peg-IFN-α治疗中获益的患者。
HBV RNA由cccDNA转录而来，并被逆转录为新的松弛环状DNA（rcDNA），最终导致cccDNA池的补充和含HBV DNA颗粒的形成，HBV RNA可作为cccDNA转录活性的替代生物标志物。HBcrAg也是一种潜在的标志物，可反映肝内cccDNA的转录情况。近年来的研究已证实，HBV RNA和HBcrAg可作为监测Peg-IFN-α抗病毒疗效的预测指标，但对于如何标准化地使用它们来识别最有可能实现HBsAg血清清除的患者亚组，尚未达成共识。
本研究评估了将HBsAg与HBV RNA和HBcrAg联合是否能增强对HBsAg血清清除的预测能力，并进一步开发了一种临床适用的治疗前策略，应用这种生物标志物组合来识别最有可能从Peg-IFN-α治疗中获益的患者。
研究方法
患者于2020年6月至2022年12月期间从四川大学华西医院（884301）招募。
纳入标准如下：接受NAs治疗≥1年的CHB患者；HBeAg阴性，伴或不伴抗-HBe阳性；在启动Peg-IFN-α治疗时，HBsAg水平≤1500 IU/mL且HBV DNA水平＜100 IU/mL。
研究结果
1、基线特征及48周Peg-IFN-α治疗期间HBsAg水平的动态变化
51例患者在48周Peg-IFN-α治疗后实现了HBsAg血清清除，血清清除率为34.0%。在Peg-IFN-α附加治疗期间，实现HBsAg血清清除的患者血清HBsAg水平出现快速且持续的下降，其中64.7%（33/51）在前24周内即实现HBsAg消失。相比之下，非血清清除组的HBsAg水平基本保持稳定，偶尔出现反弹。因此，在所有时间点，血清清除组的HBsAg水平均显著低于非血清清除组（所有p＜0.05）。
实现HBsAg血清清除的患者基线HBsAg水平显著低于未实现血清清除的患者[1.8（0.7-2.2）vs. 2.5（2.1-2.8）log IU/mL，p＜0.001]。此外，HBsAg血清清除组的基线HBV RNA[2.0（2.0-2.3）vs. 2.3（2.0-2.7）log copies/mL，p＜0.001]和HBcrAg[3.1（3.0-3.4）vs. 3.6（3.0-4.3）log U/mL，p＜0.001]水平也显著较低。
2、基线HBsAg、HBV RNA和HBcrAg与HBsAg血清清除独立相关
基线HBsAg与第48周HBsAg血清清除显著相关（OR＝4.74[2.66-8.48]，p＜0.001）。基线HBV RNA（OR＝5.11[1.78-14.67]，p＝0.002）和HBcrAg水平（OR＝3.81[1.89-7.69]，p＜0.001）也与HBsAg血清清除显著相关。将与HBsAg血清清除显著相关的变量纳入多变量模型进行分析，分析显示，基线HBsAg（OR＝4.27[2.25-8.09]，p＜0.001）、HBV RNA（OR＝6.78[1.82-25.33]，p＝0.004）和HBcrAg（OR＝2.35[1.02-5.38]，p＝0.044）水平是48周Peg-IFN-α治疗后HBsAg血清清除的独立预测因素。
在150例患者中，16例HBcrAg和HBV RNA均为阴性，35例仅HBV RNA阳性，41例仅HBcrAg阳性，58例HBV RNA和HBcrAg双阳性。四组间的中位基线HBsAg水平存在显著差异（p＜0.001），双阴性组最低[1.8（0.7-2.1）log IU/mL]，且双阴性组实现HBsAg血清清除的患者比例最高（81.2%），显著高于其他各组（均p＜0.05）。
3、基线HBsAg、HBV RNA和HBcrAg对HBsAg血清清除的预测价值
将HBV RNA加入HBsAg后，预测准确性较单独使用HBsAg显著提高[AUROC：0.833（95%CI：0.764-0.901），p＝0.011]。将HBcrAg加入HBsAg后，AUROC有较小改善，但未达到统计学显著性[AUROC：0.812（95%CI：0.740-0.883），p＝0.104]。值得注意的是，联合所有三种生物标志物（HBsAg、HBV RNA和HBcrAg）获得了最高的预测性能，AUROC为0.845（95%CI：0.781-0.909），显著优于单独使用HBsAg（p＝0.004）。
4、基线HBsAg、HBV RNA和HBcrAg在预测HBsAg血清清除中的临床实用性
基于AUROC分析，整合HBsAg、HBV RNA和HBcrAg的策略显示出最高的预测性能。满足基线HBsAg＜200 IU/mL、HBV RNA＜130 copies/mL和HBcrAg＜3.5 log U/mL的患者表现出很高的HBsAg血清清除概率，达到81.5%（22/27）。在满足其中任意一项或两项标准的患者中，血清清除率为28.1%（27/96）。不满足任何标准的患者血清清除率为7.4%（2/27）。
为了进行更简单、更具临床实用性的分层，我们分析了HBsAg＜200 IU/mL、HBV RNA检测不到且HBcrAg阴性的患者的HBsAg血清清除率。基线时，38.0%（57/150）的患者HBV RNA检测不到，34.0%（51/150）的患者HBcrAg阴性。值得注意的是，对于HBsAg＜200 IU/mL、HBV RNA检测不到且HBcrAg阴性的患者，HBsAg血清清除率达到86.7%（13/15）。相比之下，不满足任何这些标准的患者血清清除率仅为11.1%（4/36），而不属于任一极端组的患者血清清除率为34.3%（34/99）（图5C）。
研究背景
乙肝病毒感染仍是全球公共卫生问题，全球约有2.54亿慢性感染者，每年导致约110万人死亡，主要死因为肝硬化及肝细胞癌；目前以核苷（酸）类似物（NA）为主的抗病毒治疗存在长期用药可能引发耐药和经济负担等局限。因此，寻找能够有效评估疗效、指导治疗调整的生物标志物至关重要。近年来，血清HBV RNA作为反映cccDNA转录活性的指标受到关注，因其在HBV DNA转阴后仍可能持续存在，显示出在监测疗效、指导停药及预测复发方面的潜力。在此背景下，北京大学人民医院（884301）联合北京大学基础医学院发表在BMC Gastroenterology上的最新研究旨在探索NA治疗期间HBV RNA的动态变化及其与HBV DNA、HBsAg的相关性，并评估其对病毒学应答和HBeAg血清学转换的预测价值，以推动HBV RNA成为临床实用的生物标志物。
研究方法
2020年至2024年间，来自中国九家医院（884301）的427名初治HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者被纳入研究。在24个月的核苷（酸）类似物治疗期间，分析了纵向HBV RNA-DNA-HBsAg相关性。评估了其对12个月时病毒学应答和24个月时HBeAg血清学转换的预测性能。
研究结果
HBV DNA、HBV RNA、以及HBsAg在治疗过程中水平均呈现下降趋势，HBV DNA下降最快，HBV RNA次之，HBsAg下降最缓慢。HBV RNA 的中位水平在基线、12 个月和 24 个月分别为6.63（4.60-7.61）、4.19（2.32-5.31） 和 2.10（2.00-3.02）log10 拷贝/mL；未产生病毒学应答患者具有更高的基线HBV DNA（中位数7.42 vs. 5.38 log10 IU/mL，）和HBV RNA（6.63 vs. 4.60 log10 copies/mL，）。
图1： 慢性乙型肝炎患者接受核苷（酸）类似物治疗后血清HBV标志物的变化。
(A) HBV DNA水平散点图。
(B) HBV RNA水平散点图。
(C) HBV DNA：HBV RNA比值散点图。
(D) HBsAg水平散点图
在HBV RNA与其他HBV血清学标志物的相关性分析中，结果显示在NA治疗前，HBV RNA与HBV DNA相关（r = 0.6380，P = 0.001），但与HBsAg无显著相关性（r = 0.1048，P = 0.0905）。在接受12个月NA治疗后，HBV RNA与HBV DNA（r = 0.5696，P = 0.0106）及HBsAg（r = 0.5196，P = 0.0010）均相关。在接受24个月NA治疗后，HBV RNA与HBV DNA的相关性消失（r = 0.6441，P = 0.0612），而与HBsAg仍保持强相关（r = 0.9167，P = 0.0005）。
对于病毒学应答（VR），12 个月的 VR 累积发生率为 49.4%（211/427）。6 个月的 HBV RNA（HR = 0.77，95% CI = 0.52–0.90，P = 0.03）、基线的HBV DNA/HBV RNA（HR = 2.51，95% CI = 1.46–4.32，P < 0.001）以及 6 个月的 HBV DNA/HBV RNA（HR = 2.43，95% CI = 1.61–3.67，P < 0.001）与12 个月的 VR 相关。其中，HBV DNA/HBV RNA比值与12个月的VR最相关。
至于预测12个月的VR率以及24个月的HBeAg血清学转换率，HBV DNA的风险比为0.16（），受试者工作特征曲线下面积为0.889，而HBV RNA的风险比为0.77（），曲线下面积为0.754（表格4）。有关HBeAg血清学转换，HBV DNA的风险比为0.01（），曲线下面积为0.900，而HBV RNA的风险比为0.72（），曲线下面积为0.703，突显了它们在这个关键时间点一致的预后价值。
表格4：预测12个月发生病毒学反应（VR）及24个月发生HBeAg血清学转换的AUROC曲线
研究结论
在核苷（酸）类似物治疗期间，HBV RNA的动态变化经历了从与DNA相关到与HBsAg相关的转变。HBV DNA/RNA在6个月时的早期下降可以预测病毒学应答和HBeAg血清学转换，从而确立此时间点作为一个可靠且临床实用的早期预测点。HBV RNA补充了现有生物标志物，可用于优化慢性乙型肝炎的管理。
仁度生物（688193）自主研发的乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒，以其独特的检测技术、高灵敏性和高特异性等特点率先获准上市。区别于传统的PCR技术，本试剂盒采用独特的SAT技术，即RNA实时荧光恒温扩增扩增技术，能对RNA分子进行直接扩增和定量，不受样本中的HBV DNA干扰，无需DNA酶处理，检测下限低至50 copies/mL，搭载AutoSAT全自动平台，消除手工操作误差、节约实验室人力物力，为乙肝患者保驾护航。
