CAR-T疗法已经改变了部分血液肿瘤患者的治疗选择，并为他们带来长期缓解乃至潜在治愈的希望。但在带来深度缓解的同时，传统CAR-T疗法也面临一个现实问题：它通常需要先从患者体内采集T细胞，再在体外完成改造、扩增和回输。这个过程耗时耗力，也对生产、物流和医院（884301）端协同提出了很高要求。
因此，一个更大胆的方向正在加速走向临床：能否不把T细胞取出体外，而是把“改造指令”直接送入患者体内，让CAR-T细胞在人体内生成？
这正是in vivo CAR-T试图解决的问题。该技术路线利用病毒载体、脂质纳米颗粒（LNP）等递送系统作为关键载体，将编码CAR的遗传信息送入体内特定免疫细胞，使其在患者体内完成工程化改造。换句话说，CAR-T疗法的部分“生产车间”可能从体外的细胞生产设施，转移到患者体内。
从概念到临床：in vivo CAR-T迎来早期验证信号
过去很长一段时间，in vivo CAR-T更多停留在前沿概念和动物实验阶段。但近两年，随着多个项目进入临床，这一领域开始出现早期临床验证数据。
Legend Biotech公布的LB2501数据，是近期受到关注的案例之一。LB2501是一款在研CD19/CD20双靶向in vivo CAR-T疗法，用于复发或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤。根据公司公布的1期临床数据，12名患者接受了两个剂量水平的治疗，且研究未使用淋巴清除化疗。在较高剂量水平队列中，6名患者均获得客观缓解，其中5名达到完全缓解。研究还观察到剂量依赖性的体内CAR-T细胞扩增，CAR-T细胞在部分患者外周血中可检测至116天。安全性方面，公司报告未观察到剂量限制性毒性、严重不良事件、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）或死亡；输注相关反应和细胞因子释放综合征（CRS）均为1-2级。
Kelonia Therapeutics的KLN（HK0636）-1010则提供了另一个观察窗口。KLN（HK0636）-1010是一款在研BCMA靶向in vivo CAR-T疗法，用于复发或难治性多发性骨髓瘤。在美国临床肿瘤学会（ASCO）年会上公布的更新数据显示，18名患者已接受给药；在可评估患者中，观察到100%总缓解率（ORR），且所有可评估患者在治疗后1个月骨髓达到微小残留病（MRD）阴性。该研究还报告了体内CAR-T细胞生成和持续存在，以及无需预处理化疗和复杂体外细胞制造的治疗体验。
与此同时，in vivo CAR-T的探索也正在从肿瘤延伸到自身免疫性疾病。Capstan Therapeutics的CPTX2309是一款LNP递送的CD19靶向CAR-T候选疗法，用于B细胞介导的自身免疫性疾病。Orna Therapeutics的ORN-252则采用工程化环状RNA与LNP递送系统，开发CD19靶向in vivo CAR-T疗法，面向B细胞驱动的自身免疫性疾病。
这些项目仍处在早期阶段，样本量有限，仍需更长时间随访。但从产业趋势看，in vivo CAR-T已经不再只是学术概念。
In vivo CAR-T改变细胞疗法的开发逻辑，大型药企纷纷布局
与传统ex vivo CAR-T相比，in vivo CAR-T最直观的优势，是有望减少体外细胞加工步骤。对于患者而言，这可能意味着更短的等待时间、更简化的治疗流程，以及在部分项目中减少或避免淋巴清除化疗。对于产业而言，它也有望让CAR-T疗法从高度个体化的细胞生产，向更接近标准化药品生产的模式靠近。
2025年以来，多家大型药企通过收购和研发合作布局in vivo CAR-T相关技术平台。例如阿斯利康（AZN）（AstraZeneca）通过收购EsoBiotec，获得使用慢病毒载体在体内改造T细胞的技术平台。艾伯维（ABBV）（ABBVie）收购了上面提到的Capstan Therapeutics公司。吉利德科学（GILD）（Gilead Sciences）旗下Kite公司则收购了Interius BioTherapeutics，并与Pregene Biopharma达成研发及授权合作，继续加强在in vivo CAR-T领域的布局。百时美施贵宝（BMY）（Bristol Myers Squibb）通过收购Orbital Therapeutics，将in vivo CAR-T作为自身免疫性疾病治疗的重要布局方向之一。2026年，礼来（LLY）（Eli LiLLY and Company）连续宣布收购Orna Therapeutics和Kelonia Therapeutics公司，获得了以LNP和慢病毒为载体的in vivo CAR-T技术。
这些并购和合作披露的交易金额上限合计超过140亿美元，显示in vivo CAR-T领域正在成为细胞疗法、RNA药物和递送技术交汇处的重要创新前沿。
然而，in vivo CAR-T疗法的开发也面临独特的挑战：
首先是细胞靶向性。递送系统需要尽可能把编码CAR的信息送入目标免疫细胞，而不是进入肝细胞、髓系细胞或其他非目标细胞。在非预期细胞中的转导或表达，可能带来新的安全风险。
其次是递送效率。以LNP递送mRNA为例，脂质纳米颗粒与目标细胞结合、被细胞摄取、从内体逃逸、释放到胞质、完成蛋白表达，每一步都可能成为限制环节。递送效率的评价不能只看摄取，还需要看到最终功能输出。
第三个挑战是表达持续时间和可控性。病毒载体路线可能带来更持久的CAR表达和细胞扩增，但需要持续关注插入突变、免疫反应和长期安全性。mRNA/LNP路线通常表达时间较短，有利于可控性和重复给药设计，但也需要在表达强度、持续时间和疗效维持之间找到平衡。
第四个挑战是患者差异。不同患者的T细胞数量、功能状态、既往治疗史和免疫微环境不同，都可能影响体内转导效率、CAR-T细胞扩增动力学和疗效持续性。这意味着in vivo CAR-T未来的剂量探索，不能简单沿用传统CAR-T以回输细胞数量为核心的逻辑，而需要建立“载体剂量—体内递送—CAR表达—细胞扩增—药效和安全性”之间的新关系。
递送系统成为关键，一体化平台赋能相关创新疗法开发
In vivo CAR-T也改变了CMC开发的重点。
传统ex vivo CAR-T的质量控制对象，主要是体外生产得到的CAR-T细胞，包括细胞活率、纯度、CAR表达、无菌性和批次间的一致性等。相比之下，in vivo CAR-T没有体外扩增的最终细胞产品，质量控制的重点更大程度前移到递送载体本身。
这意味着，in vivo CAR-T的开发并不只是细胞治疗问题，也是RNA药物、靶向递送、纳米制剂、分析方法和CMC放大的综合问题。能否在早期研发阶段就建立可靠的递送筛选、机制验证、功能评价和可放大的制剂工艺，将直接影响候选产品能否顺利推进IND申报、临床研究和后续产业化。
药明康德（603259）生物学服务平台（WuXi Biology）围绕RNA疗法递送体系的研究与开发，建立了系统化的靶向递送评估能力，可为寡核苷酸、siRNA及mRNA等RNA药物项目提供从递送机制研究到功能验证的综合支持，同时具备线性、环状及自复制mRNA的设计与生产能力。针对RNA疗法开发中递送效率和组织特异性这一关键挑战，WuXi Biology构建了一套涵盖体外与离体实验的评估体系，用于系统分析不同递送策略在细胞水平的结合、摄取及功能递送效果。该平台能够评估多种递送形式，包括基于偶联分子的递送系统和基于纳米载体的递送系统，从而帮助合作伙伴全面理解递送体系在细胞层面的作用机制，并优化RNA药物的递送效率。
在具体技术手段方面，WuXi Biology通过流式细胞术、高内涵共聚焦成像以及实时活细胞成像等多种先进技术，对RNA递送过程中的关键环节进行可视化和定量分析。例如，平台可评估GalNAc偶联寡核苷酸与肝细胞ASGPR受体的结合及内吞效率，并通过细胞模型系统分析LNP递送mRNA在细胞内的摄取、内体逃逸以及功能性表达情况。同时，团队还能够通过Galectin（GALT）-9报告细胞系监测纳米颗粒递送体系的内体逃逸水平，从而对递送系统的功能效率进行更为精细的量化评估。
此外，WuXi Biology还具备构建主动靶向LNP递送体系的能力，例如通过共配方式引入PD-L1靶向肽或通过表面偶联抗CD22抗体，实现对特定细胞或组织的定向递送，并在多种细胞模型中系统评估其递送效率与功能表达。通过整合递送体系设计与功能评价能力，WuXi Biology能够为RNA疗法项目提供从递送策略筛选到机制验证的一体化支持，加速新型RNA递送技术的优化与转化，助力合作伙伴推进RNA创新疗法的发现与开发。
LNP是in vivo CAR-T技术中的重要载体之一。药明康德（603259）旗下合全药业（WuXi STA）的脂质纳米颗粒平台旨在帮助客户项目从研发阶段快速推进到临床和商业化生产阶段。
平台的LNP研发实验室配备了多通道微混合系统、不同规模的切向流过滤（TFF）系统、无菌过滤系统和分析设备。并且配备其他混合技术与设备，例如MIVM、微流体、精密纳米系统和LNP挤出系统。研发实验室可进行LNP可行性研究、制剂开发和工艺开发。
平台的LNP生产车间为模块化设计，将多通道芯片、微混合系统和复杂的制备系统整合到一个以多通道微混合器为核心的LNP生产平台中，在药物载量、脂质体粒径控制和包封效率方面有显著的优势。此外，模块化设计提供了更高的灵活性，使该平台能够支持各种生产规模，每批可达10-50升。
值得一提的是，合全药业也可以提供寡核苷酸和特定功能性脂质（如可电离脂质和聚乙二醇化脂质）的合成和生产服务。该平台提供端到端服务，包含原料药（884143）、制剂和分析支持的一体化CMC开发和生产服务。
In vivo CAR-T仍处于早期验证阶段。它能否真正走向更多患者，还需要更大样本、更长随访和更系统的安全性、有效性及生产一致性数据来回答。但可以确定的是，这一方向正在推动CAR-T疗法的开发重心发生变化：从“如何在体外制造一批细胞”，延伸到“如何在体内精准、安全、可控地生成治疗性细胞”。
当CAR-T疗法从体外制造进一步走向体内编程，真正的关键不只是把编码CAR的信息送进细胞，而是把递送、表达、质量评估和生产放大整合成一条可转化的开发路径。围绕这些关键环节，药明康德（603259）将继续依托一体化、端到端的CRDMO赋能平台，支持全球合作伙伴推进下一代创新疗法的发现、开发与转化，让更多前沿科学有机会加速走向患者。
